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                    新聞動態
                    水飽和酚和Tris飽和酚--兩種核酸提取試劑
                    發布于:2011-06-28 11:50:13 點擊次數:10394次  

                    水飽和酚和Tris飽和酚( Phenoi Water/Tris-phenol)的區別

                    一、水飽和酚又叫水平衡酚。水飽和酚的PH小于7,一般是PH為5.0左右,通常與異硫氫酸胍一起使用,用于細胞RNA的提取,在酸性環境中,DNA在酚相,RNA在水相。兩者就分開了。

                    二、Tris飽和酚一般PH大于7.8,用于DNA的提取。其中,酚是強的蛋白變性劑,可以使細胞或組織中的蛋白質變性析出。 而Tris的主要作用是防治止酚類氧化,若酚類氧化,則會形成醌(兩個苯環),醌含有強自由基,會破壞核酸結構。 同時,由于PH值大于7,在堿性環境中DNA處于水相,RNA處于有機相。從而分離上清,即可得到DNA。

                     Tris飽和酚的配置:

                    1、冰箱取出重蒸酚,室溫放置---68度水浴溶化,切勿立即放入68度的水浴中,以防玻璃炸裂

                    2、加8-羥基喹啉至0.1%和β-巰基乙醇至0.2%,(原液14. 4MOL/ML),混勻,溶液呈現黃色,倒入分液漏斗中(也可在燒杯中進行)

                    3、加入等溶劑的1MOL/ML的Tris(PH8.0),反復混勻后,靜至分層;放出下層黃色酚液,棄上層

                    4、加固體Tris約1g/100ml酚,搖勻,去水相

                    5、加0.1MOL/MLTris(PH8.0)平衡數次,至PH為8.0

                    6、加0.1MOL/MLTris(PH8.0)于棕色瓶中4度保存

                    7、如黃色消失或呈粉紅色(說明酚已經被氧化),則不能使用

                    注:重蒸酚為白色針狀結晶體,有較強的腐蝕性,應盡量避免皮膚接觸或吸入體內。如發現變為紅色或棕色,表明發生氧化,不能使用。保存要求:避光保存。

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